在细胞培养领域，我们通常将细胞划分为两类：贴壁细胞和悬浮细胞。贴壁细胞需要附着在培养皿上才能生长，而悬浮细胞则可以在液体培养基中自由漂浮、增殖。一般认为，只有贴壁细胞需考虑培养皿表面的友好性，是否需要用胶原蛋白或多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）等物质进行包被来增强附着力。然而，如果你认为悬浮细胞永远不需要包被，那你可能被它们轻盈的外表迷惑了。实际上，在一些关键实验中，悬浮细胞也可能需要暂时“靠岸”，甚至需要包被表面的帮助。今天，我们就来探讨一下悬浮细胞何时需要包被，包被又该如何进行，以及其目的是什么。

什么是多聚赖氨酸（PLL）包被？

多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）是一种人工合成的阳离子多肽，具有丰富的氨基基团，整体带有强正电荷。由于细胞膜表面通常带负电，PLL可以通过静电吸附作用将细胞吸附在表面，因此广泛应用于：

• 初代神经元和干细胞等难以贴壁的细胞培养
• 组织切片或细胞爬片染色的固定
• 增强某些表面抗体或细胞的结合能力

在贴壁细胞中，PLL包被可以提高细胞的附着速度和均匀性，而在悬浮细胞中，包被则主要用于短期固定与功能性实验的结合。

悬浮细胞需要包被的常见场景

1. 免疫荧光成像与免疫染色：悬浮细胞在普通培养皿中操作容易因洗涤过程中的吸头吸走或漂移而影响成像。将细胞置于PLL包被的玻片或培养皿中，可以实现短暂固定，提升图像的稳定性和信噪比。

2. 电转染后的细胞收集：经过电转染的悬浮细胞在恢复期可能较为脆弱，直接离心可能会丢失大量活细胞；而在PLL包被的板底短暂培养4-6小时后让部分细胞贴附再回收，有助于提高转染效率和活细胞比例。

3. 细胞富集或原位功能检测：如ELISPOT、细胞毒性检测等实验需在细胞“原位”观察反应，这类实验对细胞分布和位置的稳定性要求较高，因此常用PLL或细胞外基质进行包被固定悬浮细胞。

4. 悬浮细胞低密度培养聚团问题：在低密度培养下，悬浮细胞可能因漂浮过快而无法增殖，或形成异常聚团影响观察，适当包被可以帮助形成一些“锚点”，减少细胞间漂浮干扰。

5. 外泌体/病毒收集实验中的细胞定点处理：在外泌体研究中，保持细胞的分泌稳定状态有时会选择在轻度PLL包被条件下固定悬浮细胞，确保细胞因漂浮密度的差异不会影响上清产物的一致性。

如何正确使用PLL包被？

需要注意的是：对悬浮细胞的包被并不是为了让它们像贴壁细胞一样长期生长。大多数情况下，包被的目的是：

• 为实验窗口期提供短暂固定
• 提高操作效率和成像质量
• 增强细胞在实验平台上的一致性

长时间的附着可能影响细胞状态，甚至改变其生物学特性。因此，根据实验的目的合理设置处理时长和强度是非常重要的。

什么时候不使用包被？

并非所有悬浮细胞实验都需要包被。在以下情况下，应该避免使用包被：

• 长期培养的悬浮细胞工艺（如293F在生物反应器中培养），应避免使用包被，而是使用低附着力培养皿（如聚HEMA处理）。
• 需要完全无附着状态的实验（如免疫学中的某些流式功能检测、抗体介导的细胞毒性测试等），此时包被可能会影响结果的真实性。

总结

悬浮细胞在某些情况下也需要“靠岸”。无论是为了成像、收集、固定还是维持操作的稳定性，适当的表面包被（如PLL）在关键环节中能够显著提高实验的成功率与数据质量。因此，在生物医疗研究中，选择人生就是博-尊龙凯时的优质材料与技术，将为您的实验带来更多的可能性和成功。